《中国药典》（现行版本为 2025 年版）中未对集菌仪的具体操作步骤进行详细图文描述，但在 通则 1101 无菌检查法 和 通则 1121 微生物限度检查法 中，明确规定了集菌仪在 薄膜过滤法 中的应用原则和技术要求。以下是基于药典通则内容提炼的操作规范及关键要点： 

一、适用范围 

集菌仪主要用于药品、生物制品等的 无菌检查（确认样品是否含活菌）和 微生物限度检查（测定样品中微生物数量及控制菌），通过 薄膜过滤法 实现以下操作： 样品过滤：截留微生物于滤膜表面，排除样品抑菌成分或富集低浓度微生物。 冲洗与中和：用冲洗液或中和剂消除样品干扰，确保后续培养准确性。 接种培养：将滤膜转移至培养基中，观察是否有菌生长。 

二、核心操作流程（基于药典通则） 

1.设备与耗材准备 集菌仪要求： 具备 蠕动泵 驱动管路，可调节流速（通常 0.1～100mL/min），并能保持恒定压力。 配套 无菌集菌培养器（含滤膜，孔径一般为 0.45μm，用于微生物限度检查；0.22μm 用于无菌检查）。 灭菌要求： 集菌培养器、滤膜、管路等耗材需经 湿热灭菌（121℃，30 分钟）或 无菌采购（一次性无菌产品）。 操作需在 无菌环境 下进行（如洁净工作台或无菌隔离系统）。

2. 样品过滤 样品制备： 按药典要求制备供试液（如溶解、稀释样品），若样品含防腐剂或抑菌成分，需先 中和（如加入中和剂、灭活酶或采用薄膜冲洗法）。 过滤操作： 将集菌培养器安装至集菌仪，连接样品瓶与蠕动泵管路。 启动蠕动泵，将供试液通过滤膜过滤（流速以不堵塞滤膜为宜，通常 5～20mL/min）。 若样品黏稠或含颗粒，需先 预过滤（用相同孔径滤膜或离心处理），避免滤膜堵塞。 

3. 滤膜冲洗与中和（关键步骤） 冲洗目的：去除样品残留的抑菌成分，同时避免微生物被过度冲洗损失。 冲洗液选择： 常用 pH7.0 氯化钠 - 蛋白胨缓冲液、无菌水 或 含 0.1% 聚山梨酯 80 的缓冲液（针对油脂类样品）。 若样品含抗生素，需加入 中和剂（如青霉素酶中和青霉素类药物）。 冲洗量： 无菌检查：每膜冲洗量 ≤1000mL（药典通则 1101），分次冲洗，每次不宜超过 200mL。 微生物限度检查：每膜冲洗量 100～200mL（药典通则 1121），可分 2～3 次完成。 

4. 接种与培养 无菌检查： 过滤完毕后，用无菌剪刀剪下滤膜（若为封闭式集菌器，可直接开启培养端口）。 将滤膜 等分剪开，分别转移至 硫乙醇酸盐流体培养基（培养需氧菌 / 厌氧菌）和 胰酪大豆胨培养基（培养真菌）中。 培养基用量需覆盖滤膜，培养温度与时间按药典规定（如需氧菌 30～35℃培养 14 天，真菌 20～25℃培养 14 天）。 微生物限度检查： 过滤后，直接将滤膜贴于 营养琼脂培养基（菌落总数）、玫瑰红钠培养基（霉菌酵母）或特定选择性培养基（控制菌）表面。 倒置培养，温度与时间按标准执行（如菌落总数 36±1℃培养 48 小时）。 

5. 结果观察与判断 无菌检查： 若培养基澄清，或虽浑浊但经确证无菌生长，判为 符合规定；若浑浊且确证有菌生长，判为 不符合规定。 微生物限度检查： 计数滤膜上的菌落数，换算成每单位样品中的微生物数量，与药典标准对比（如口服固体制剂菌落总数≤100CFU/g）。 

三、药典关键技术要求 

滤膜适用性： 滤膜需通过 无菌检查 和 孔径验证（如气泡点测试），确保无外源污染且截留能力符合要求。 阴性与阳性对照： 每次检验需做 阴性对照（取同体积冲洗液过滤培养，应无菌生长）和 阳性对照（接种已知菌验证培养基灵敏度）。 抑菌成分处理： 若样品有抑菌性，需通过 中和试验 确定冲洗量或中和剂用量（药典通则 1121 附录 Ⅵ）。 环境控制： 操作需在 万级背景下的局部百级洁净区 进行（无菌检查），或 不低于 D 级洁净环境（微生物限度检查）。 四、注意事项（药典隐含要求） 防止交叉污染： 每检一个样品需更换管路和滤器，若连续检测同类型样品，需用 75% 酒精消毒管路接口 后再更换。 设备清洁验证： 清洁后需进行 微生物残留验证（如擦拭法检测设备表面菌落数），确保无 previous sample carryover。 记录要求： 需记录过滤体积、冲洗量、培养条件、菌落数等原始数据，符合《药品生产质量管理规范》（GMP）追溯要求。 

五、药典原文引用索引 

无菌检查法： 《中国药典》2025 年版 通则 1101《无菌检查法》 通则 1121《非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法》 薄膜过滤法操作细节： 附录 ⅩⅢ C《药品微生物实验室质量管理指导原则》中 “薄膜过滤法” 章节。 如需更详细操作，建议结合那艾仪器集菌仪提供的 验证方案（需通过药典适用性测试）和实验室 SOP，确保操作符合法规要求。